乳酸脱氢酶测定试剂盒（乳酸底物法）使用说明书

　　  [产品名称]

　　  通用名称：乳酸脱氢酶测定试剂盒（乳酸底物法）

　　  英文名称：Lactate Dehydrogenase Kit（L-Lactate Substrate Method）

　　  英文简称：LDH Kit

　　  [包装规格]

　　  剂型：液体双剂型

　　  R1：80ml×3  R2：72ml×1

　　  R1：60ml×3  R2：54ml×1

　　  R1：60ml×2  R2：18ml×2

　　  R1：45ml×3  R2：40ml×1

　　  R1：5ml×1   R2：1.5ml×1

　　  [预期用途]

　　  本产品用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶的活性。

　　  乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH，E.C.1.1.1.27）是由心型（H）和肌型（M）两亚基组成的四聚体，人体内有五种同工酶（LDH1～LDH5），分子量为34000。在高氧耗的组织中H型亚基占主导，如心肌组织中的LDH1约占LDH总活力的50%；在高糖酵解的组织中M型亚基占主导，如横纹肌中以LDH5为主，而在脾和肺组织中以LDH3为主。

　　  临床上测定血液中LDH的活性，常用于诊断心肌梗死、肝和骨骼肌的疾病。

　　  临床检测乳酸脱氢酶指标常用的方法有两种：①以乳酸和NAD+为底物，从乳酸氧化成丙酮酸的正向反应，称乳酸底物法；②以丙酮酸和NADH为底物，从丙酮酸还原成乳酸的逆向反应，称丙酮酸底物法。本产品即以其中的乳酸底物法为反应原理，此检测方法试剂稳定性好，保持线性速率反应的时间范围较宽，重复性好[1, 2]。

　　  [检验原理]

　　  乳酸脱氢酶催化L-乳酸到丙酮酸的正向脱氢反应，使氧化型辅酶Ⅰ（NAD+）还原生成还原型辅酶Ⅰ（NADH）,引起340nm波长处吸光度的升高；吸光度的升高与血清中乳酸脱氢酶的活力成正比。反应式如下：

　　  [主要组成成份]

　　  说明：

　　  不同批号的试剂不能混用；新打开的试剂不宜与已用过的试剂混合在一起，否则易造成试剂稳定性下降。

　　  [储存条件及有效期]

　　  1.原包装试剂在2℃～8℃避光贮存，有效期12个月。

　　  2.试剂开盖后在2℃～8℃避光保存，稳定期30天。

　　  [适用仪器]

　　  本试剂盒适用于HITACHI 7180/7170/7060/7080/7600P、OLYMPUS AU 400/600/640/2700/5400 、BECKMAN COULTER CX5 、BECKMAN DXC-800、TOSHIBA 40FR/120FR全自动生化分析仪和各种半自动生化分析仪。

　　  [样本要求]

　　  1.样本种类：新鲜无溶血血清。

　　  2.样本采集：常规静脉采血约3ml，置于玻璃试管中，样本采集后，立即密封送检，严格避免溶血[3]。

　　  3.样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。

　　  4.样本保存：样本2℃～8℃可稳定3天，忌冻融。

　　  [检测方法]

　　  1.试剂的准备：试剂开瓶即可使用。

　　  2.检测步骤：

　　  （1）全自动生化分析仪操作步骤：

　　  基本操作步骤：（波长：340nm  温度：37℃  比色杯光径：1cm）

　　  上机操作步骤：参数设置→试剂装载→校准→质控→样本加载→测定→结果审核→报告。

　　  （2）半自动生化分析仪操作步骤：先将R1和R2按照10:3的比例混匀配制成工作液，然后将工作液和样本按照65：2的比例混匀，上机测定。

　　  3.校准：使用K因数校准，也可使用Roche校准品校准；当试剂更换批号、质控出现漂移、仪器做完保养、重要零件更换时应重新进行校准。

　　  4.质量控制：每天对样本进行检测之前，须进行质量控制，以保障测试系统的稳定性。建议采用本公司生化多项质控品或Roche质控品进行室内质控，质控品测定结果应在允许范围内。若超出质控范围，需查找原因，如仪器、试剂与质控品的状态或参数设置等。

　　  5.检验结果的计算：生化分析仪会自动给出检测结果。

　　  NADH在340nm波长下毫摩尔分子消光系数为6.3。

　　  [参考范围]

　　  根据参考文献[2]获得以下参考范围：

　　  健康成人为109U/L～245U/L。

　　  各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考范围。

　　  [检验结果的解释]

　　  专业人员负责检验结果的审核。检验结果会受到受检者年龄、性别、体重等的影响。通常情况下，其结果如在参考范围内，认为正常；如在临界区域内，应重新测定进行确认；如明显超出参考范围或确认检测后仍超出参考范围，则认为血清LDH活性异常。检验结果如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。

　　  [检验方法的局限性]

　　  1.乳糜（Intralipid）≤1000mg/dl时，对测定结果没有明显干扰。

　　  2.溶血对测定结果有干扰，样本应严格避免溶血。

　　  3.Vc≤100mg/dl时，对测定结果没有明显干扰。

　　  4.胆红素≤40mg/dl时，对测定结果没有明显干扰。

　　  5.检测结果与所使用的仪器种类、型号和校准品相关，使用不同的仪器或校准品，检测结果可能会有差异。

　　  [产品性能指标]

　　  1.外观：a)  R1应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。b)  R2 应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

　　  2.试剂空白吸光度：在波长340nm（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤0.600；试剂空白吸光度变化率（△A/min）≤0.003。

　　  3.准确度：

　　  出厂检验：测定Roche质控品，测定值与标示值的相对偏差应不超过±15%。

　　  型式检验：测定国家标准物质GBW(E)090284或GBW(E)090285，测定结果的相对偏差应不超过±10％。

　　  4.分析灵敏度：活性为200U/L的LDH所引起的吸光度变化率（△A/min）应在0.010～0.050的范围内。

　　  5.重复性：测定值的变异系数（CV）应≤5%。

　　  6.批间差：试剂盒的批间差（R）应≤6%。

　　  7.线性范围：

　　  在5U/L～1000U/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；

　　  在5U/L～50U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±5U/L；

　　  在50U/L～1000U/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%。

　　  [注意事项]

　　  1.试剂避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。

　　  2.使用前应该认真阅读产品说明书，使用后的器具须按照相关医疗废弃物的处理规定处理。

　　  3.由于运输过程产生渗液或漏液的产品，或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂，不可使用。

　　  4.本产品仅适用于临床体外诊断，需专业人员使用。

　　  5.如医院使用其它型号的全自动生化分析仪，请各医院根据实际需要进行验证。

　　  [标签中图标解释]

　　  [参考文献]

　　  1.陆永绥、李清华、张伟民主编.临床检验自动化仪器分析标准操作规程.浙江大学出版社.2006.

　　  2.中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程（第3版）.东南大学出版社. 2006.

　　  3.王惠萱、李雪梅、王珂主编.临床检验样本采集手册.云南科技出版社.2008.

　　  [生产企业]

　　  企业名称：中生北控生物科技股份有限公司

　　  注册地址：北京市昌平区科技园区超前路27号

　　  生产地址：北京市昌平区科技园区超前路27号

　　  [医疗器械生产企业许可证编号]

　　  京药监械生产许20000271号

　　  [医疗器械注册证书编号]

　　  京食药监械（准）字2014第2401131号

　　  [产品标准编号]

　　  YZB/京 1736-2013

　　  [说明书批准日期及修改日期]

　　  2014年9月22日